Näytteen valmistus jaLadataan
Koska useimmissa tapauksissa käytetään jatkuvaa puskurijärjestelmää ilman pinottavaa geeliä, näytteillä tulee olla sopiva pitoisuus ja pieni tilavuus. Käytä apipettiLisää näyte hitaasti, 5-10 μg per kuoppa, jotta vältetään erottelukyvyn merkittävä heikkeneminen. Kunnäytteen lataus, virtalähde on katkaistava. Näytteen tulee sisältää indikaattoriväriä (0,025 % bromifenolisinistä tai oranssia) ja sakkaroosia (10-15 %) tai glyserolia (5-10 %) sen tiheyden lisäämiseksi, näytteen konsentroimiseksi ja diffuusion estämiseksi. Joskus sakkaroosi tai glyseroli voi kuitenkin aiheuttaa U-muotoisia juovia elektroforeesituloksissa, jotka voidaan välttää käyttämällä 2,5 % Ficollia (polyvinyylipyrrolidonia).
Elektroforeesi
Elektroforeesin jännite on 5-15 V/cm, yleensä noin 10 V/cm. Suurten molekyylien erottamiseksi jännitteen tulee olla pienempi, yleensä enintään 5 V/cm.
Värjäys
Fluoresoivaa väriainetta etidiumbromidia (EB) käytetään yleisesti värjäykseen DNA-juovien havaitsemiseksi agaroosigeelissä. EB voi insertoitua DNA-molekyylien emäsparien väliin, jolloin EB sitoutuu DNA:han. DNA:n 260 nm:n ultraviolettivalon absorptio siirtyy EB:hen, ja sitoutunut EB emittoi fluoresenssia 590 nm:ssä näkyvän valon spektrin punaoranssilla alueella. Geelin värjäys 1 mmol/l MgSO4-liuoksessa 1 tunnin ajan voi vähentää sitoutumattoman EB:n aiheuttamaa taustafluoresenssia, mikä helpottaa pienten DNA-määrien havaitsemista.
EB-väriaineella on useita etuja: se on helppokäyttöinen, ei riko nukleiinihappoja, on erittäin herkkä ja voi värjätä sekä DNA:ta että RNA:ta. EB:tä voidaan lisätä näytteeseen ja seurata UV-absorption avulla milloin tahansa. Värjäyksen jälkeen EB voidaan poistaa uuttamalla n-butanolilla.
EB-väriaine on kuitenkin voimakas mutageeninen aine, ja käsittelyn aikana tulee noudattaa varotoimenpiteitä, kuten käyttää polyeteenikäsineitä. Akridiinioranssi on myös yleisesti käytetty väriaine, koska se pystyy erottamaan yksijuosteiset ja kaksijuosteiset nukleiinihapot (DNA, RNA). Se osoittaa vihreää fluoresenssia (530 nm) kaksijuosteisille nukleiinihapoille ja punaista fluoresenssia (640 nm) yksijuosteisille nukleiinihapoille. Lisäksi värjäykseen voidaan käyttää muita väriaineita, kuten metyleenisinistä, metyleenivihreää ja kinoliini B:tä.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) on erikoistunut elektroforeesiinstrumenttien valmistukseen yli 50 vuoden ajan oman ammattitaitoisen teknisen tiimimme ja T&K-keskuksen kanssa. Meillä on luotettava ja täydellinen tuotantolinja suunnittelusta tarkastukseen ja varasto sekä markkinointituki. Päätuotteemme ovat elektroforeesikenno (säiliö/kammio), elektroforeesivirtalähde, sininen LED-läpivalaisin, UV-transilluminaattori, geelikuva- ja analyysijärjestelmä jne.
Etsimme nyt kumppaneita, sekä OEM-elektroforeesisäiliö että jakelijat ovat tervetulleita.
Jos sinulla on ostosuunnitelma tuotteillemme, älä epäröi ottaa meihin yhteyttä. Voit lähettää meille viestin sähköpostitse[sähköposti suojattu]tai[sähköposti suojattu], tai soita meille numeroon +86 15810650221 tai lisää Whatsapp +86 15810650221 tai Wechat: 15810650221.
Skannaa QR-koodi lisätäksesi Whatsapp tai WeChat.
Postitusaika: 20.12.2023